Śmiertelne zapalenie mózgu wywołane zakażeniem wirusem ludzkiego wariantu B-6 u pacjenta po przeszczepie szpiku kostnego ad

Nadal otrzymywała leczenie immunosupresyjne z prednizonem i cyklosporyną w leczeniu rozległej przewlekłej choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi. Rozpoczęto leczenie gancyklowirem w połączeniu z terapią czynnikiem wzrostu z czynnikiem stymulującym kolonie granulocytów. Pacjent otrzymał łącznie osiem tygodni terapii przeciwwirusowej. Wszystkie kolejne hodowle dla wirusa cytomegalii były ujemne. Dwa tygodnie po odstawieniu leczenia przeciwwirusowego pacjent został przyjęty do szpitala z postępującym pogorszeniem stanu psychicznego, charakteryzującym się głęboką utratą pamięci krótkotrwałej, dezorientacją w odniesieniu do czasu i miejsca, niezdolnością do wykonywania czynności samopomocy, sennością , wycofanie społeczne i nietrzymanie moczu. Tomografia komputerowa głowy i rezonans magnetyczny znów były ujemne. Nie stwierdzono żadnych nieprawidłowości metabolicznych. Płyn mózgowo-rdzeniowy i posiew krwi były negatywne dla organizmów wirusowych, grzybowych i bakteryjnych. Analiza płynu mózgowo-rdzeniowego wykazała 3 komórki białe na milimetr sześcienny, z poziomem glukozy 53 mg na decylitr (2,9 mmol na litr) i poziomem białka wynoszącym 94 mg na decylitr. Konsultacja neurologiczna nie ujawniła żadnych widocznych ogniskowych zaburzeń motorycznych, czuciowych lub móżdżkowych. Stan neurologiczny pacjenta pogarszał się i zmarła siedem dni po wystąpieniu objawów. Wykonano autopsję. Metody
Nadzór mikrobiologiczny i badania izolacji wirusowej
Próbki gardła-płukania gardła, moczu i kożuszka leukocytarnego uzyskano co najmniej raz w tygodniu przez pierwsze 100 dni w rutynowej izolacji wirusowej za pomocą fibroblastów, pierwotnych komórek małpy i nerki oraz komórek A549. Wszystkie próbki zostały również zaszczepione na monowarstwach ludzkich fibroblastów w fiolkach skorupowych i przetworzone przez pośrednią immunofluorescencję za pomocą przeciwciała monoklonalnego specyficznego dla jednego z wczesnych wczesnych antygenów wirusa cytomegalii (Dupont Specialty Diagnostic, Billerica, Mass.). Hodowle obwodowej krwi dla HHV-6 uzyskano przed przeszczepieniem i co tydzień przez 14 tygodni. Procedura hodowli komórkowej do izolacji HHV-6 została wcześniej opisana9.
Izolacja DNA, reakcja łańcuchowa polimerazy i hybrydyzacja specyficzna dla sekwencji oligonukleotydów
Genomowy DNA ekstrahowano za pomocą dodecylosiarczanu sodu i trawienia proteinazą K, a następnie wytrącanie etanolem. DNA amplifikowano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy i starterów specyficznych dla HHV-6. Zamplifikowany DNA hybrydyzowano do sond specyficznych dla wariantu i konsensusu. Warunki reakcji, sekwencje starterów, temperatury płukania i hybrydyzacji oraz sekwencje nukleotydowe dla wariantu A, wariantu B i sondy konsensusu zostały opisane w innym miejscu10.
Badania immunohistochemiczne
Astrocyty wykrywano przez barwienie immunohistochemiczne za pomocą króliczej surowicy odpornościowej swoistej dla kwaśnego białka glejowo-włóknistego (Dako, Carpinteria, CA). Myelin była poplamiona błękitem Luxol. Poprzednio opisaną procedurę barwienia immunohistochemicznego awidyną-biotyną9 zastosowano do wykrywania komórek zakażonych HHV-6 w utrwalonej formaliną, zatopionej w parafinie tkance mózgowej. Wyniki barwienia immunohistochemicznego potwierdzono mysim przeciwciałem monoklonalnym reagującym z białkiem strukturalnym p101 HHV-611.
[przypisy: cannabis nasiona, wrastający paznokieć wrocław, zajecia dla kobiet w ciazy ]

Dodaj komentarz

Twój adres email nie zostanie opublikowany. Pola, których wypełnienie jest wymagane, są oznaczone symbolem *

Powiązane tematy z artykułem: cannabis nasiona wrastający paznokieć wrocław zajecia dla kobiet w ciazy